Title Escherichia coli에서의 Streptomyces coelicolor A3(2)의 acetyl xylan esterase 발현 양상
Author 이인숙· 윤석원· 정상운1· 오충훈1· 김재헌1 *
Address 단국대학교 미생물학전공, 1단국대학교 의학레이저연구센터
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 39(2),83-88, 2003
DOI
Key Words acetyl xylan esterase, cloning, gene, PCR amplification, signal peptide, Streptomyces coelicolor A3(2)
Abstract Streptomyces coelicolor A3(2)의 acetyl xylan esterase 유전자를 Escherichia coli에 클로닝하여 그 발현양상을 조사 하였다. 이를 위하여 유전자 전체 DNA를 PCR증폭을 통하여 제조하였다. PCR 산물의 염기서열을 분석한 결과 1,008개의 nucleotide로 구성된 하나의 open reading frame이 존재함을 확인하였고, 이것은 335개의 아미노산으로 이루어진 약 38 kDa의 단백질을 생성할 것으로 예측할 수 있었다. 이 유전자의 염기 서열은 Streptomyces lividans 의 acetyl xylan esterase와 98%의 상동성을 가졌다. 그런데 Escherichia coli (pLacI)에서 IPTG 유도에 의해 두 가지 의 acetyl xylan esterase가 발현되었으며 각각의 분자량은 38 kDa과 34 kDa이었다. 이중에서 38 kDa의 단백질은 N-말단의 signal peptide를 포함한 전체 단백질이고, 34 kDa의 단백질은 41번과 42번의 두 알라닌 잔기사이의 펩 티드 결합이 끊어져 생산된 것으로 추정되었다.
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