Title 2가 양이온이 Thiamine Pyrophosphate에 의한 Croup I Intron Ribozyme의 Splicing 억제에 미치는 영향
Author 안성준· 박인국 *
Address 동국대학교 생물학과
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 38(1),13-18, 2002
DOI
Key Words divalent cation, self-splicing, T4 phage, td intro ribozyme, thiamine pyrophosphate
Abstract 2가 양이온(Mg^2+, Mn^2+, Zn^2+)이 조효소 thiamine pyrophosphate에 의한 T4파지 티민생합성 유전자 (td) 인트론 RNA의 splicing에 미치는 영향을 조사하였다. Mg^2+를 30 mM까지 증가시켰을 때 splicing 활성은 농도에 비례하여 증가하였다. 그러나 Mg2+이 존재하지 않는 상태에서 0.1-4 mM 농도에 걸쳐 Zn^2+를 사용한 결과 약 20% 정도의 splicing이 일어났다. 이때 대부분의 splicing product는 인트론-엑손2 및 엑손2였고 엑손1-엑손2는 검출되지 않았다. 그리고 4 mM 농도에서는 RNA가 대부분 가수분해되는 현상이 나타났다. Mn^2+ 이온은 사용한 농도 범위 (0.1-8 mM)에서 Zn^2+ 보다는 전반적으로 약간 증가된 splicing 활성을 보였으며 8 mM 농도에서도 약 30% 정도의 splicing 활성을 보였다. Zn^2+ 이온처럼 splicing product는 인트론-엑손2 및 엑손2였고 엑손1-엑손2는 검출되지 않았다. 반면에 splicing반응에 10 mM Mg^2+를 첨가했을 때 Zn^2+과 Mn^2+이온은 평균 약 35-40% 정도 splicing활성을 촉진시키는 것으로 나타났다. 실험한 2가 양이온 중에서 특히 Mg^2+은 가장 낮은 농도에서 thiamine pyrophosphate 에 의한 억제반응을 극복하는 최고의 활성효과를 나타냈다. 이와 같은 억제 회복 효과는 Mg^2+에 의한 리보자임의 td intron 구조적 안정성에 기인하는 것으로 추정된다.
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