| Title | TNT에 대한 세균의 반응기작: 생존율, 스트레스 유도단백질의 SDS-PAGE 및 2-D 전기영동 분석 | ||
| Author | 장효원 · 강형일1 · 김승일2 · 오계헌 * | ||
| Address | 순천향대학교 자연과학대학 생명과학부; 1제주대학교 기초과학연구소; 2기초과학지원연구원 생체고분자분석팀 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 38(2),67-73, 2002 | ||
| DOI | |||
| Key Words | cellular response, Pdeudomonas sp. HK-6, stress shock proteins, 2,4,6-trinitrotoluene | ||
| Abstract | 폭약 2,4,6-trinitrotoluene (TNT)스트레스 조건하에서 토양세균 Pseudomonas sp. HK-6의 세포반응에 대하여 조사하였다. 다양한 농도의 TNT에 노출됨으로서 약 70-kDa DnaK와 60-kDa GroEL의 스트레스 충격단백질 (stress shock proteins, SSPs)이 단백질이 유도되었다. 이들 SSPs의 존재는 SDS-PAGE과 anti-DnaK와 anti-GroEL monoclonal antibodies를 이용한 Western bolt을 통하여 확인되었다. SSPs은 0.5 mM TNT로 6-12 시간 처리된 세포에서 나타났으며, TNT에 노출 후 8시간대에서 최대의 단백질 유도가 관찰되었다. 30℃에서 42℃로 열변환충격을 주었을 때의 SSPs는 TNT노출에서와 유사한 유도양상을 보여주었다. TNT에 노출된 Pseudomonas sp. HK-6세포에서 유도된 SSPs의 존재는 배양된 세포의 수용성 단백질 분획에 대하여 2-D PAGE를 통하여 확인되었다. Coomassie brilliant blue R25O로 염색된 젤로부터 pH 3-10 범위에서 약 450 개의 spots이 탐침되었으며, 이들 가운데 12 개의 spots이 TNT 스트레스에 대하여 현저하게 유도되었다. Gel상에서 가장 짙게 나타난 대표적인 spot에 대한 N-말단 아미노산 서열을 분석한 결과, ¹XXAKDVKFGDSARKKML^17로서, Pseudomonas putida의 GroEL의 N-말단 아미노산 염기서열인 ¹MAAKDVKFGDSARKKML^17과 동일한 것으로 분석되었다. | ||
| Download PDF | Kor_380203_67-73p.pdf | ||