| Title | 재조합 균주 Escherichia coli (pLL200K)가 생산하는 Bacillus circulans endo-β-1,3-1,4-glucanase의 정제 및 특성 | ||
| Author | 김지연 | ||
| Address | 인제대학교 유전공학연구소 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 38(4),241-246, 2002 | ||
| DOI | |||
| Key Words | Bacillus circulans, endo-β-1,3-1,4-glucanase, Ni-NTA metal-affinity chromatography, purification | ||
| Abstract | Bacillus circulans의 endo-β-1,3-1,4-glucanase 유전자를 발현 vector pQE30에 삽입시키고 E. coli Ml5에서 발현시켜 효소를 생산·정제하였다. 생산된 endo-β-1,3-1,4-glucanase는 nickel-nitrilotriacetic acid (Ni-NTA) metal-affinity chromatography 과정을 거쳐 단일 단백질로 정제되었다. 정제된 효소의 분자량은 SDS-PAGE 전기영동법으로는 28 kDa이었다. 효소 최적 활성 pH와 온도는 각각 pH 6.8과 60℃였다. 이 효소는 pH 5.5~7.5와 55℃ 이하의 온도에서 안정하였다. 또한 본 효소는 여러 가지 금속 이온에 의해 대부분의 활성이 억제되었고, 특히 Hg^2＋에서는 강하게 효소 활성이 저해됨을 보였다. 유기 용매에 대한 활성은 10%의 methanol이나 ethanol, isopropanol, 1-butanol 에 대하여 모두 낮은 활성을 나타내었다. | ||
| Download PDF | Kor_380402_241-246p.pdf | ||