| Title | Bacillus subtilis와 Bacilus megaterium에서의 β-1, 3-glucanase 유전자의 발현 | ||
| Author | 김기훈 · 김지연1 · 김한복2 · 이동석 * | ||
| Address | 인제대학교 의생명공학대학 임상병리학과; 1인제대학교 바이오헬스 소재 연구센터; 2호서대학교 자연과학부 생명과학전공 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 37(4),253-258, 2001 | ||
| DOI | |||
| Key Words | Bacillus circulans, B. megaterium, β-1,3-glucanase, shuttle vector, stability | ||
| Abstract | Bacillus circulans KCT3004 기원의 β-1,3-glucanase 유전자를 함유한 재조합 플라스미드 pLM460과 pUB110을 이용하여 shuttle 플라스미드 pMLS1180을 제작하고 Bacillus 세포에 이동·발현시켰다. pLMS1180으로 형질전환된 B. subtilis와 B. megaterium은 효율적으로 β-1,3-glucanase를 생산하였고, 이 효소들은 세포의 증식과 비례하여 생산되었다. 형질전환체가 생산하는 β-1,3-glucanase의 최대 활성을 유전자 공여 균주인 B. circulans와 비교하여 보니, B. subtilis는 14배, B. megaterium은 5배 정도의 높은 활성을 나타내었다. 그리고 대장균 형질전환체는 분비율이 7% 정도인데 반하여 B. subtilis 형질전환체는 생산된 효소를 전부, B. megaterium 형질전환체는 약 97%를 세포 외로 분비하는 것을 알 수 있었다. SDS-PAGE를 통해 대장균과 B. subtilis, B. megaterium에서 발현된 효소의 분자량을 분석해 보니 약 38,000으로 추정되었다. 또한, 이들 형질전환체가 생산하는 β-1,3-glucanase는 laminarin에 작용하여 주된 산물로서 laminaribiose (G2), laminaritriose (G3) 이상의 다양한 laminarioligosaccharide들을 생산함이 확인되었다. pLMS1180의 각 숙주 내에서이 안정성을 살펴본 결과 B.megaterium에서는 88%, 대장균에서는 75%, B. subtilis에서는 48%로 나타났다. | ||
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