| Title | Bacillus circulans α-amylase 유전자의 Basillus subtilis와 Bacillus megaterium에서의 클로닝 및 발현 | ||
| Author | 김지연1 · 김한복2 · 이동석 * | ||
| Address | 인제대학교 의생명공학대학 임상병리학과; 1인제대학교 생물건강산업육성지원센터; 2호서대학교 자연과학부 생명과학전공 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 36(3),203-208, 2000 | ||
| DOI | |||
| Key Words | α-amylase, Bacillus circulans, B. megaterium, B. subtilis, shuttle vector, stability | ||
| Abstract | 재조합 플라스미드 pAL850에 함유된 Bacillus circulans KCTC3004 α-amylase 유 전자를 pUB110을 이용하여 shuttle 플라스미드 pALS111을 만들어 Bacillus 세포에 이동· 발현시켰다. Bacillus subtilis(고초균)와 Bacillus megaterium(거대균)으로 형질전환된 pALS111로부터 α-amylase는 세포증식과 비례하여 생산되었다. 형질전화주가 생산하는 α -amylase의 최대활성을 ?너자 공여 균주인 B. circulans와 비교했을 때 고초균은 약 95배, 거대균은 약 34배 정도의 높은 활성을 나타내었다. 그리고 대장균 형질전환주는 분비율이 10% 정도인데 반하여 고초균 형질전화주는 생산된 효소전부를 , 거대균 형질전환주는 약 98%를 세포외로 분비함을 보임으로써 고초균과 거대균은 실용적인 면에서 대장균보다 우월 함을 나타내었다, pALS111의 각 숙주 내에서의 안정성을 살펴본 결과 거대균에서는 92%, 고초균에서는 76%, 대장균에서는 38% 로 나타났다. SDS-PAGE와 zymogram을 통해 추정 된 대장균과 고초균, 거대균에서 발현된 효소의 분자량은 약 55,000으로 확인되었다. 이들 형질전환주가 생산하는 α-amylase는 starch에 작용하여 주된 산물로서 maltotriose 이상의 다양한 maltooligosaccharide들을 생산함이 확인되었다. | ||
| Download PDF | Kor_360307_203-208p.pdf | ||