Title 쉬파리 유래 항균텝티드 Defensin의 생산 증진을 위한 재조합 Saccharomyces cerevisiae의 배양적 특성
Author 강대욱 · 이준원 · 김민수 · 김보연 · 오원근 · 민태익 · 안종석 *
Address 생명공학 연구소
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 36(3),236-241, 2000
DOI
Key Words defensin, media optimization, MFα1 preprosequence, production, recombiant Saccharomyces cerevisiae
Abstract 효모 S. cerevisiae를 숙주 세포로 이용하여 활성형의 항균펩티드를 생산하기 위한 model system으로서 쉬파리 유래 defensin의 합성 유전자를 GAP promoter, mating factor α1 (MFα1)의 preprosequence 및 GAL7 transcription terminator의 조절하에 있는 재조합 plasmid pGMD18을 제작한 후 S. cerevisiae에 형질전환하여 growth inhibition zone assay를 통해 항균활성을 보유한 재조합 효모를 선별하였다. 재조합 효모의 성장속도와 defensin의 분비능을 증가시키기 위하여 최적의 배지 조성과 배양조건을 결정하였다. 재조합 효모의 defensin 생산을 위한 최적 배양조건을 조사한 결과 0.4% yeast extract, 유기질소원 2% corn steep liquor, 탄소원 2.5% glucose, 0.05% CaCO_3를 포함한 배지에서 초기 pH3, 그리고 배양온도 28℃의 경우가 세포성장과 defensin의 항균활성이 가장 우수하였다. 이 조건으로 배양을 수행한 결과 YPD 배지에서 배양한 조건보다 약 2배의 세포 성장과 약 4배의 defensin 생산을 확인하였다.
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