Title |
수계바이러스검출에 PCR을 이용하기 위한 효과적인 농축기법 |
Author |
이승훈 · 김상종 * |
Address |
서울대학교 자연과학대학 미생물학과 |
Bibliography |
Korean Journal of Microbiology, 35(1),41-46, 1999 |
DOI |
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Key Words |
adsorption-elution/PEG precipitation, enterovirus, flocculation/ultracentrifugation, PCR |
Abstract |
수계에 분포하는 장바이러스를 검출하기 위해 민감도가 높고 검출시간이 빠른 PCR법을 이용하였다. 바이러스입자를 보다 순수하게 농축하기 위해 몇 가지 바이러스농축법을 비교조사하고 그것의 변형을 통하여 개선된 방법을 확립하였다. 비교한 농축방법중 흡탈착/Polyethyleneglycol(PEG) 침전법과 플록화/촉속원심분리법을 통해 10 PFU ml^-1 까지 검출이 가능하여 다른 방법에 비해 효과적임이 판명되어Te. Sephadex resin을 이용한 부가적인 시료정제 과정을 통해 시료의 순도를 높일 수 있어 검출한계를 10배정도 낮추었다. 선정된 검출법을 통해 한강수계에서 장바이러스의 분포를 조사한 결과 조사한 시료 중 한강의 지천에서는 75%, 본류에서는 20%의 시료에서 바이러스가 검출되었다. 본 조사결과 흡탈착/PEG 침전법-PCR 검출기법이 수계의 바이러스 오염도를 간편하고 신속하게 검출하는데 매우 유용하였으며 국내 수계에도 바이러스 오염이 광범위함을 확인하였다. |
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