Title Aspergillus nidulans mtDNA 의 자기복제 절편
Author 장승환 · 한동민1 · 장광엽 *
Address 전북대학교 유전공학연구소; 기초과학연구소; 자연과학대학 생물과학부; 1원광대학교 분자생물학과
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 35(3),218-225, 1999
DOI
Key Words Aspergillus midulans, ABFI, ANRI, ARS, mtDNA
Abstract Aspergillus nidulans 의 DNA 로부터 Saccharomyces cerevisiae에서 스스로 복제가능하고, 형질전환율도 삽입벡터에 비해 10^4 배정도 높여주는 절편(ANR1, 4,950 bp)을 분리한 바 있다. A. nidulans에서 ANRI 의 일부(4,520bp EcoRI 절편)를 포함한 pILJ16-4.5는 삽입벡터인 pILJ16보다 170배 정도 높은 형질전환 효율을 보였으며, S.cerevisiae와 마찬가지로 plasmid 상태로 회수 가능했다. A.nidulans 세포내에서 2-3 copy 정도로 염색체와는 별개로 존재하는 것으로 나타났으며, 재형질전환능력도 있었다. ANRI은 미토콘드리아의 DNA에서 유래한 절편으로 밝혀졌으며, AT의 함량이 74.7%로 높았다. 하나의 ARS 핵심공통절편인 (A/T)TTTAT(A/G)TTT(A/T)을 포함하고, ARS 공통절편과 유사한(10/11일치) 절편도 11곳에 존재한다. ΦX174와 SV40 DNA에서 gyrase 가 결합하는 부위의 공통편인 YRTGNYNNY(Y=C또는 T, R=A 또는 G, N=A, G, C 또는 T)도 6곳에 존재하며, ColE1에서 gyrase가 결합하는 b site(CACTTTACC)와 일치하는 절편도 하나 포함하고 있으며, ABF1 결합 부위의 공통절편과 유사한 절편(TCN_7ACG)도 하나 포함하고 있다. 이를 토대로 ANRI은 A.nidulans의 형질전환 후 회수가 가능한 replicating vector 개발에 이용할 수 있다.
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