| Title | Enterobacter agglomerans CBNU45로 부터 분리된 제한효소 EagBI 의 특성 | ||
| Author | 최영주¹ · 김성재¹ · 황혜연² · 임정빈²'³ · 김영창¹'³ * | ||
| Address | ¹충북대학교 자연과학대학 미생물학과; ²서울대학교 자연과학대학 미생물학과; ³서울대학교 분자미생물학 연구센터 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 32(1),91-95, 1994 | ||
| DOI | |||
| Key Words | Type II restriction endonuclease, EagBI, isoschizomer, PvuI, cleavage site | ||
| Abstract | 토양에서 분리된 Enterobacter agglomerans CBNU45는 type II 제한효소인 EagBI을 생산하고 있음을 발견하였다. EagBI을 DEAE-cellulose, phosphocellulose P11, hydroxylapatite column chromatography를 거쳐 부분 정제하여 그 특성을 알아보았다. EagBI은 여섯개의 염기배열 5’-CGAT↓CG-3’을 인식하고 T 와 C 사이를 절단하여 두개의 염기가 3’-말단쪽으로 돌출된 cohesive end를 형성하였다. EagBI의 반응 최적조건은 10mM Tris-HCl(pH 7.8), 6~10mM MgCl_2, 37℃이었으며 NaCl이 없는 반응 완충용액에서 가장 좋은 활성을 보였다. EagBI은 dam-와 dam+ 메칠화 DNA도 절단할 수 있으며 65℃에서 10분 동안 열처리하였을 때 효소의 활성을 상실하였다. 따라서 EagBI은 PvuI의 isoschizomer이나 NaCl 요구성과 열안정성에서 PvuI보다 편리한 제한효소로 확인되었다. | ||
| Download PDF | Kor_320115_91-95p.pdf | ||