| Title | Streptoverticillium olivoverticallatum에서 분리한 새로운 Type II 제한효소 SolI의 특성연구 | ||
| Author | 황혜연 · 임정빈 * | ||
| Address | 서울대학교 자연과학대학 미생물학과, 분자미생물학 연구센터 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 32(3),208-214, 1994 | ||
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| Key Words | type II restriction endonuclease, SolI, Streptoverticillium olivoverticillatum | ||
| Abstract | 토양으로부터 분리한 방선균주로부터 새로운 type II 제한효소를 분리하여 그 특성을 연구하였다. 이 균주는 수리분석 결과, Streptoverticillium olivoverticillatum으로 동정되었으며, 정제한 제한효소는 SolI이라 명명하였다. SolI은 bamHI의 isoschizomer로서 여섯개의 염기서열 5’-G↓GATCC-3’을 인지하며 두 개의 G염기 사이에서 절단하여 4 base가 돌출된 5’말단을 생성한다. 그러나 BamHI과는 달리, dam methylation 되어 있는 인식 염기서열에는 작용하지 못하였다. Ammonium sulfate 분획(30~65%)과 heparin-agarose, Affi-gel Blue column chromatography를 거쳐 SolI을 부분 정제하였다. SolI은 활성을 보이기 위하여 0.2mM 이상의 MgCl_2를 반드시 필요로 하였으며, 다른 cofactor는 요구하지 않았다. NaCl이 없을 때 가장 높은 활성을 가지며 120mM 이상의 NaCl이 있으면 활성이 완전히 억제되었다. 이 효소의 반응 최적 온도는 40℃, 최적 pH는 8.6으로 나타났다. Gel filtration chromatography 에서의 용출부피 비교로부터 이 효소의 분자량은 약 43,000Da인 것으로 추정된다. | ||
| Download PDF | Kor_320307_208-214p.pdf | ||