| Title | 보리수나무 뿌리혹 공생균주인 Frankia EuIK1의 nifH, D클로닝 | ||
| Author | 김호방 · 김준호 · 송순달¹ · 안정선 * | ||
| Address | 서울대학교 자연과학대학 생물학과; ¹경북대학교 자연과학대학 생물학과 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 32(4),258-263, 1994 | ||
| DOI | |||
| Key Words | Elaeagnus umbellata, Frankia EuIK1 strain, genomic library, nifH,D, molecular cloning | ||
| Abstract | 보리수나무(Elaeagnus umbellate) 뿌리혹에서 분리한 공생균주인 Frankia 균주 EulK1 게놈에 대해 K. pneumoniae의 nifH,D를 탐침으로 Southern hybridization을 수행한 결과, 3.2Kb와 5.5Kc BamHI 절편과 15Kb PstI 절편이 강한 혼성화 반응을 보여 이들 절편에 nifH, D 유전자가 존재함을 확인하였다. 동일 탐침을 사용한 colony hybridization을 통해 pWE15 cosmid vector에 작성된 게놈 library로부터 하나의 nif-클론(pEuNIF)을 선별하였다. 이 클론을 BamHI으로 전달한 후 동일한 탐침으로 혼성화 반응을 수행한 결과, 3.2Kb와 5.5Kb가 강한 혼성화 반응을 보였으며, 이 결과는 게놈 혼성화 반응 결과와 일치하였다. 그러나 Frankia FaC1의 nifH 만을 탐침으로 이용한 결과 3.2Kb BamHI 절편만이 혼성화 반응을 나타내었다. 또한 3.2Kb의 3’말단과 5.5Kb의 5’말단의 염기서열로부터 추론한 아미노산 서열을 ArI3의 nifD와 비교한 결과 182번부터 240번까지 241번부터 282번까지의 아미노산 서열과 각각 매우 높은 유사성을 보였다. 이러한 결과로부터 3.2Kb절편에는 nifH와 일부의 nifD 서열이 존재하고, 이 절편에 연속된 5.5Kb 절편에는 나머지 nifD 서열이 존재함을 알 수 있었다. | ||
| Download PDF | Kor_320403_258-263p.pdf | ||