Title Pleurotus ostreatus에서 분리된 Glyoxalase I의 특성
Author 김성태 · 양갑석 · 석영재 · 허원기 · 강사욱 *
Address 서울대학교 자연과학대학 미생물학과, 분자미생물학연구센터
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 32(4),315-321, 1994
DOI
Key Words glyoxalase I, L-xylosonse, hydroxypyruvaldehyde, intramolecular proton tranfer, Pleurotus ostreatus
Abstract Pleurotus ostreatus로부터 glyoxalase I(S-lactoyl-glutathione methylglyoxal, EC4.4.1.5)이 S-hexylglutathione affinity chromatography, Sephadex G-150 gel permeation chromatography, DEAE-sepharose A-50 CL-6B ion exchange chromatography를 통해 순수분리되었다. 이 결과, 전체활성도의 21.7%를 수확하였으며, 분리 배수는 2,294배 이었다. Gel filtration chromatography로 측정한 효소의 분자량은 34kDa이며, SDS-PAGE 결과 본 효소는 분자량 17 kDa인 동일한 소단위체 두개로 구성된 이합체라고 생각된다. Methylglyoxal 과 phenylglyoxal에 대한 K_m 값은 각각 0.39mM 과 0.22mM이며 L-zylosone과 hydroxypyruvaldehyde에 대해서도 강한 친화력을 보여주었고, pH 6.5~7.5, 35~45℃에서 활성도가 가장 높았다. 이 효소의 반응 과정을 핵자기공명분광법으로 분석한 결과, 분자내의 양성자 전달과정이 뚜렷이 관찰되었다.
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