| Title | Pseudomonas putida SM 25의 Catechol 1,2-Dioxygenase의 부분정제와 이에 의한 cis, cis-Muconic Acid의 생성 | ||
| Author | 김지연¹’³ · 김성태²’³ · 강사욱²’³ · 민경희¹’³ | ||
| Address | ¹숙명여자대학교 생물학과; ²서울대학교 미생물학과; ³서울대학교 분자미생물학연구센터 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 32(5),409-416, 1994 | ||
| DOI | |||
| Key Words | Pseudomonas putida SM 25, Catechol 1,2-Dioxygenase, cis, cis-Muconic Acid | ||
| Abstract | Pseudomonas putida SM 25로부터 catechol 1,2-dioxygenase를 ammonium sulfate precipitation, DEAE-deoharose A-50 CL-6B ion exchange chromatography, phenyl-sepharose CL-4B hydrophobic chromatography 및 preparative gel permeation chromatography를 통해 정제배율 806.2배, 정제수율 10.6%로 부분정제하였다. Phenol, benzoate, catechol 및 salicylate가 효소를 유도하였으며, 그 중 5mM phenol dl 가장 좋은 결과를 나타내었다. 이 효소는 catechol에 대해서는 우수한 효소 활성을 보였으나, 4-methylcatechik, pyrogallol 및 protocatechuate 에 대해서는 거의 활성을 보이지 않았으며, catechol에 대한 K_m 값은 7.8M 이었다. 이 효소는 pH 7.5 40℃에서 가장 높음 활성을 보였다. 이 효소는 pH 7.0~11.0에서 안정하였으며, 열에 불안정하여 50℃에서 15분 네에 활성을 완전히 잃었고, thiol기 저해제에 의한 영향은 받지 않았다. 이 효소에 의한 catechol의 반응산물을 UV-visible spectroscopy, HPLC-diode array spectroscopy, GC-mass spectrometry로 분석한 결과, cis, cis-muconic acid로 확인되었다. | ||
| Download PDF | Kor_320513_409-416p.pdf | ||