| Title | 새로운 벡터 pRP7을 이용한 난분해성 방향족 화학물 분해세균의 분자육종 | ||
| Author | 강형일 · 황세현 · 이진규 · 박용근 · 이영록 * | ||
| Address | 고려대학교 이과대학 생물학과; 서울대학교 분자미생물학 연구센터 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 32(6),510-516, 1994 | ||
| DOI | |||
| Key Words | Molecular breeding, recombinant plasmid, salicylate hydroxylase, catechol 2,3-dioxygenase, catechol 1,2-dioxygenase | ||
| Abstract | 난분해성 방향족화합물을 강력하게 분해할 수 있는 균주를 개발코자 broad host range vector인 RSF1010에 pTS1137으로부터 강력한 promoter를 가진 부위를 도입, 새로운 고발현 벡터 pRP7을 조립하였다. 새로운 재조합 플라스미드인 pRP7을 벡터로 이용하여, EcoRI으로 소화하고 여기에 Pseudomonas putida PpG7으로부터 salicylate 및 catechol 분해능을 갖는 유전자 부위를 같은 효소로 소화하여 재조합하고 아닐린, salicylate 및 catechol 분해능이 있는 Pseudomonas acidovorans K82, Achromobacter gr. D. V.K24, Flavimonas oryzihabitans K22 등에 형질전환하여 saliculate 분해능이 크게 향상된 P. acidovorans K82-1, A. gr. D.V. K24-1, F. oryzihabitans K22-1 균주들을 육종하였다. 이들은 salicylate 분해능이 크게 향상되었을 뿐만 아니라 보다 고농도의 기질도 분해하는 특성을 나타내었다. 육종균주들의 아닐린 분해능은 모균주들과 큰 차이가 없었으나 salicylate 최소배지에서 배양후 24시간대에서의 salicylate 분해능은 모균주들에 비해 P. acidovorans K82-1과 F. oryzihabitans K22-1은 9배나 증가하였고, A. gr. D.V. K24-1은 2배 가량 증가하였다. M9 최소배지에서 2.5mM 농도의 salicylate를 첨가한 액체배지에서 48시간동안 배양한 P. acidovorans K82-1의 salicylate hydroxylase 활성은 모균주에 비해 약 2배 높았고, 새로이 강력한 catechol 2,3-dioxygenase 활성을 나타내었지만, 아닐린을 기질로 사용하였을 때는 모균주와 같이 catechol 1,2-dioxygenase 활성만을 나타내어 기질에 따라 대사경로가 달라짐을 알 수 있었다. | ||
| Download PDF | Kor_320611_510-516p.pdf | ||