Title 대장균에 발현시킨 Human Hepatitis B Virus 중합효소의 특성연구
Author 정지훈 · 노현모¹ · 정구홍 *
Address 서울대학교 생물교육과; ¹서울대학교 분자생물학과
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 32(6),565-570, 1994
DOI
Key Words Human hepatitis B virus, MBP-fused HBV polymerase, DNA-dependent DNA polymerase activity, RNA-dependent DNA polymerase activity
Abstract B형 간염 바이러스의 DNA합성에 필수적인 역할을 하는 중합 효소의 특성을 조사하였다. 대장균에서 발현시켜 분리한 maltose binding protein(MBP)와 융합된 human HBV 중합효소는 DNA-dependent DNA polymerase 활성과 RNA-dependent DNA polymerase 활성을 모두 지니고 있다는 것이 확인되었다. Activity gel assay를 통해서 활성을 지닌 MBP-fused HBV 중합효소가 존재하는 것이 확인되었다. 분리된 MBP-fused HBV 중합효소는 MgCl_2의 농도 2.5mM에서 DNA-dependent DNA polymerase 활성과 RNA-dependent DNA polymerase활성이 최고치를 나타냈으며, MnCl_2의 농도 1.0mM 과 0.25mM에서 각각 최대 활성을 나타냈다. KCl은 MBP-fused HBV 중합효소의 두 활성에 대해 저해효과를 나타냈다. MBP-fused HBV 중합효소는 pH 7.0~7.7에서 안정한 효소활성을 나타내었으며, DNA-dependent DNA polymerase 활성은 pH 7.4에서 RNA-dependent DNA polymerase 활성은 pH 7.0에서 가장 높은 활성을 나타냈다. MBP-fused HBV 중합효소는 반응시간의 증가에 따라서 효소활성도가 증가함을 볼 수 있었다.
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