| Title | Rhizobium fredii USDA191 의 체외다당류 합성관련 유전자(exo) 의 클로닝 및 lacZ 와의 융합 | ||
| Author | 정완석 · 고영환 * | ||
| Address | 제주대학교 식품공학과 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 31(1),27-36, 1993 | ||
| DOI | |||
| Key Words | Rhizobium fredii, exopolysaccaride, transcription, gene fusion, promoter | ||
| Abstract | Rhizobium fredii USDA191 은 대기 중의 질소를 환원하여 식물체의 생육에 필요한 질소원을 공급해주는 세균으로 다량의 체외 다당류를 합성한다. 전위요소 Tn5의 삽입에 의한 돌연변이 유도로 다당류결핍 변이주 R. fredii YKL293 가 분리되었으며 이 변이주로부터 Tn5 에 인접한 DNA 단편이 pUC19 에 클로닝되었고(pLYK5293),이 DNA 단편을 탐침으로 하여 λ NM1149 에 구성되 USDA191 genomic library 로부터 야생형체외다당류 합성관련 유전자(exo) 를 함유한 클론 λ NM1149 22E 를 plaque 혼성화에 의하여 분리하였다. 클론 NM1149.22E 에 들어있는 exo 유전자를 pBR322 에 옮겨서 pJW33을 만들고, 재조합체 pJW33 을 Escherichia coli POII734 에 도입시켜 lacZ 구조유전자를 함유한 MudI 1734 가 exo 유전자의 프러모토와 융합되어 lacZ 구조유전자의 전사가 이루어지도록 하였다. 위와 같이 만들어진 재조합체 플라스미드 pUM21을 함유한 E. coli JM83 은 β-galactosidase 를 합성하였으며, 야생형 tacZ 유전자를 갖고 있는 E. coli LE392 에 비해서 14~25배 정도 낮은 역가를 보였다. | ||
| Download PDF | Kor_310105_27-36p.pdf | ||