| Abstract |
Escherichia coli, Pseudomonas putida, Salmonella typhimurium, Flavimonas oryzihabitans, Agrobacterium tumefaciens, Achromobacter xylosoxydans 등 넓은 숙주범위를 갖는 광역숙주범위 벡터 pKB1을 새로이 조립했다. pKB1은 12.6kb 크기의 플라스미드로, EcoRI, BamHI, BglII에 대한 단일절단부위를 갖고 있으며, ClaI에 대해 2개, PstI에 대해 3개 부위등 10개 이상의 다양한 제한효소에 대한 인지부위를 갖고 있다. pKB1은 tetracycline(Tc)등에 대한 유전자와 ampicillin(Ap)을 분해하는 bla 유전자를 포함하고 있고, pBR322 유래의 리플리콘과 pKU10 유래 리플리콘을 함께 갖고 있는 이분되는 리플리콘 플라스미드로서 매우 다양한 숙주세포들에서 안정하게 유지되었다. 선별압을 가하지 않고 7일간 배양하였을 때 pKB1의 Ap와 Tc 표지에 대한 저항성은 E. coli에서는 90%이상 안정하게 나타났고, P. putida 에서는 Ap에 대해서는 90%이상 안정하였으나 Tc에 대한 저항성은 82%이상의 안정성을 나타내었다. F. oryzihabitans에서의 Ap에 대한 저항성은 90%이상, Tc에 대한 저항성은 80%이상의 안정성을, A. xylosoxydans, S. typhimurium에서의 Ap, Tc에 대한 저항성은 E. coli와 P. putida 보다 다소 낮은 각각 80% 내외의 안정성을 나타내었으나, A. tumefaciens에서는 Ap에 대한 저항성은 80%, Tc에 대한 저항성은 68%의 안정도를 나타내었다. |
