Title Streptomyces exfoliatus로부터 얻어진 제한효소의 분리정제 및 성질에 관한 연구
Author 배무 * · 박정옥 · 황혜연¹ · 임정빈¹
Address 이화여자대학교 자연과학대학 생물과학과; ¹서울대학교 미생물학과; 서울대학과 분자미생물학 연구센터
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 31(6),544-549, 1993
DOI
Key Words Setrptomyces exfoliatus, SexIII
Abstract 30가지의 방선균 균주를 대상으로 제한 효소를 탐색하였는데, 이 중 한 균주 (Streptomyces exfoliatus)로부터 제한효소의 활성을 발견하여 이로부터 제한효소 SexIII를 분리정제하고 그 특성을 조사하였다. 제한효소의 정제는 streptomycine sulfate 침전, DEAE-cellulose, hydroxylapatite, phosphocellulose P11 column chromatography에 의해 행해졌고, SDS-polyacrylamide gel electrophoresis에 의해 소단위체의 분자량이 56,000 dalton 으로 추정되었다. 이 효소는 lambda DNA를 네 군데, pBluescript를 한 군데 자른다. 활성은 넓은 범위의 pH에서 안정하였고 75mM 이상의 염에 의해서 저해된다. 활성을 위해 고농도(20-40 mM)의 MgCl_2가 요구되며 다른 효소들과 달리 낮은 농도의 MgCl_2에서는 부분절단이 일어나는 것이 특징이었다. Lambda DNA를 이용하여 제한효소의 지도를 작성한 결과 인식서열이 5'-CCGC/GG-3'으로 밝혀졌으므로 이 SexIII는 SacII의 isoschizomer임이 확인되었다.
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