Title Glucoamylase 유전자의 promoter 와 분비신호서열을 이용한 bacillus subtilis endo-1-4-g-β-glucanase 의 효모에서 분비
Author 안종석 * · 강대욱 · 황인규 · 박승환 · 박무영1 · 민태익
Address 학국과학기술연구원 유전공학연구소; 1한국과학기술원 생물공학과
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 30(5),403-409, 1992
DOI
Key Words STA1, Signal sequence, CMCase
Abstract STA1 유전자의 promoter 와 분비신호서열을 이용하여 B. subtilis 의 CMSase 를 분비하는 재조합 효모균주를 육성하였다. STA1A 유전자의 promoter, 분비신호서열, TS region 및 mature glucoamylase N-말단부위의 아미노산 98개와 B. subtilis 의 CMCase 구조유전자가 차례로 연결된 재조합플라스미드 pYESC24 를 제작한후 효모에 형질전환하였으나 CMCase 가 세포외로 분비되지 않았다. 반면에 STA1 의 TS region 및 mature glucoamylase N-말단 아미노산 98 개를 제거하여 CMMase 구조유전자갸 STA1 의 분비신호서열에 바로 연결된 재조합 플라스미드 pYESC11 에 의한 효모형질전환 균주는 CMCase 분비능이 아주 우수하였다. 이 형질전환 균주를 YPD 배지에서 4 일간 배양한 후 세포부위 별 CMCase 역가를 측정한 결과 배양액 1 m/당 총역가 44.7 unit 존재하였으며 이중 93% 이상이 배양상등액에서 관찰되었다.
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