| Abstract |
Quinoline (2,3-benzopyridine)을 유일한 탄소원과 질소원, 그리고 에너지원으로 이용하는 Pseudomonas sp. NFQ-1을 실험 균주로 사용하였으며, 균주로부터 catechol 1,2-dioxygenase (C1,2O)를 유도하기 위하여 탄소원으로 benzoate를 사용하였다. C1,2O의 효소학적 특징을 조사하기 위하여 benzoate에서 배양한 Pseudomonas sp. NFQ-1을 초음파 분쇄기로 파쇄하고, ammonium sulfate 침전과 gel permeation chromatography 및 Source 15Q의 과정을 실시하여 C1,2O를 분리 및 정제하였다. 정제된 C1,2O의 특이활성(specific activity)은 14.21 unit/mg으로 나타났으며, SDS-PAGE에 의해 조사된 C1,2O의 분자량은 약 33 kDa이었다. C1,2O는 catechol과 4-methylcatechol 및 3-methylcatechol에 대해서 효소활성을 나타내는 것으로 확인되었다. C1,2O의 Km은 38.54 mM로 측정되었고, Vmax는 25.10 mmol·min-1·mg-1으로 나타났다. C1,2O는 30oC와 pH 8.5에서 최적활성을 나타내는 것으로 조사되었으며, Ag^+, Hg^+, Ca^2＋, 그리고 Cu^2+는 C1,2O의 활성을 억제하였다. 분석되어진 N-말단 아미노산 서열은 1TVKISQSASIQKFFEEA17이었으며, Pseudomonas aeruginosa PA01과 82%로 가장 높은 유사성을 보였고 Pseudomonas arvilla C-1와는 71%, Pseudomonas putida KT2440과는 59%, 그리고 Pseudomonas sp. CA10과는 53%의 상동성이 각각 존재하는 것으로 확인하였다. |
