| Abstract |
국내에서 분리된 우수 섬유소분해 균주인 Trichoderma sp. C-4가 생성하는 endoglucanase 중 하나를 (NH_4)_2SO_4 침 전, Sephacryl S-200 gel filtration, DEAE-Sepharose A-50 ion exchange, Mono-P chromatofocusing (FPLC)의 단계로 정제하고 이를 F-I-III라 명명하였다.분리된 효소 F-I-III는 분자량 56,000Da, 등전점 4.9로 측정된 단일 단백질이 었다. F-I-III는 55^oC에서 가장 높은 활성을 보였으며, pH 5.0이 반응 최적 조건이었다.50^oC에서 24시간 동안 안 정하였으며, pH 4-7의 범위에서 안정하였다. CMC에 대한 비활성은 315.4U/mg 이었으며, PNPG2에 대한 Km 값 은 2.69mM이었다. 이 효소는 같은 균주에서 분리한 다른 endoglucanase와 exoglucanase를 섞었을 때 결정형 섬 유소인Avicel분해에 대한 상승효과를 보였다. Mg^2+, Co^2+, Fe^2+, Ca^2+, Cs^+, Li^+ 등의 이온은 1mM의 농도에서 효소 의 활성에 큰 영향을 미치지 않았고, 1mM의 환원제 (cystein, EDTA, [beta]-mercaptoethanol, dithiothreitol(DTT), L-ascorbic acid) 들은 효소의 활성을 증가시켰다. F-I-III의 N-말단 서열을 분석하여 QPGTSTPEVHPKKLTTYK의 서열을 얻었다. 이는 Trichoderma reesei의 endoglucanase인 EGI과 95%의 유사도를 나타내었다. 분리된 효소 F-I-III는 높은 비활성을 가지고 있어서 활용가치가 높을 것으로 사료되었다.
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