| Title | 접합전달을 이용한 Streptomyces natalensis ATCC27448의 형질전환 최적화 및 attB-site의 특성연구 | ||
| Author | 이강무, 최선욱, 박해룡, and 황용일* | ||
| Address | 경남대학교 식품생명공학부 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 41(2),140-145, 2005 | ||
| DOI | |||
| Key Words | attB site, conjugal transfer, natamycin, Streptomyces natalensis ATCC27448 | ||
| Abstract | 상업적으로 중요한 macrolide계 항진균 항생물질인 natamycin을 생산하는 Streptomyces natalensis ATCC27448의 분자 유전학적인 연구를 위해 대장균으로부터 S. natalensis로 plasmid DNA를 직접 도입하는 형질전환법을 확립하였다. 이러한 S. natalensis의 형질전환은 oriT와 attP 단편을 가지고 있는, [phi]C31 유래의 integration 벡터인 pSET152를 이용하여 Escherichia coli ET12567/pUZ8002을 DNA 공여체(donor)로 이용한 접합전달법(conjugal transfer)을 사용하여 확립하였다. 접합전달의 가장 높은 효율은 10 mM의 MgCl_2를 포함한 MS 배지에서, 6.25 *10^8의 E. coli 공여체와 열처리를 하지 않은 S. natalensis의 포자를 사용하여 얻어졌다. 또 얻어진 접합전달체(exconjugant)에 대하여 southern blot hybridization과 벡터가 삽입된 염색체부분의 염기서열분석을 통해 attB site와 pseudo-attB site를 확인하다. attB site의 경우에는 다른 방선균들처럼 S. natalensis 염색체의 pirin 상동체를 코드하는 ORF내에 존재하였으나 pseudo-attB site는 염색체내 다른 site (GenBank accession no. YP_117731)에 존재하였고 그 염기서열은 attB 염기서열과 차이를 나타내었다. | ||
| Download PDF | 41(2)-03(p.140-145).pdf | ||