Title Corynebacterium glutamicum의 sigH 유전자의 분리 및 기능분석
Author 김태현, 김형준, 박준성, 김연희1, and 이흥식2,*
Address 고려대학교 생명공학원, 1세명대학교 한의과대학 한의학과, 2고려대학교 과학기술대학 생명정보공학과
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 41(2),99-104, 2005
DOI
Key Words Corynebacterium glutamicum, sigH, sigma factor, stress
Abstract 유전자 lacZYA가 aceB 유전자의 프로모터 하단에 연계된 (P_aceB-lacZYA) 리포터 플라스미드를 함유하는 Escherichia coli를 이용하여 glyoxylate bypass를 매개하는 유전자중 하나인 aceB의 발현을 조절하는 것으로 여겨지는 Corynebacterium glutamicum 클론들을 색판독에 의해 분리하였다. 이 중 한 개의 클론을 선택하여 분석한 결과 이 클론을 함유한 E. coli는 리포터 플라스미드에서 발현되는 [beta]-galactosidase의 활성이 약 40% 감소하였고 이는 클론에서 발현되는 단백질이 aceB프로모터에 작용함에 기인한 것으로 판단되었다. 서열분석결과 ORF1과 ORF2의 두 개의 인접한 ORF가 발견되었고 이중 ORF2가 reporter plasmid의 [beta]-galactosidase의 활성 감소에 직접적으로 기여함을 알 수 있었다. ORF1은 206아미노산으로 구성된 23,218 Dalton의 단백질을 발현하는 것으로 여겨졌고, 유사성 분석결과 ECF-type에 해당되는 RNA polymerase의 sigma factor를 암호화하는 것으로 보여 sigH로 명명하였다. 유전자 sigH의 기능을 밝히기 위해 gene disruption technique을 이용하여 sigH유전자가 기능을 하지 못하는 돌연변이 균을 제작하였으며 이 균주는 야생형에 비해 성장속도가 저하됨을 관찰하였다. 또한 변이균은 oxidative stress를 유발하는 pumbagin등에 대해서도 민감성을 나타내었다. 이들 결과는, 유사성 분석결과에서도 볼 수 있듯이 sigH유전자가 세포성장과정 중 처하게 되는 각종 stress 중 특히 oxidative stress에 대한 대응과 관련되어 발현될 수 있음을 암시한다.
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