| Title | Corynebacterium glutamicum에서 분리된 프로모터를 이용한 메치오닌 생합성 유전자의 조절해제 | ||
| Author | 박수동, 박익현, 최종수1, 김일권1, 김연희2, and 이흥식3,* | ||
| Address | 고려대학교 생명공학원, 1한국 BASF 기술연구소, 2세명대학교 한의과대학 한의학과, 3고려대학교 과학기술대학 생명정보공학과 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 41(4),300-305, 2005 | ||
| DOI | |||
| Key Words | Corynebacterium glutamicum, homoserine acetyltransferase, metX, methionine, promoter | ||
| Abstract | Corynebacterium glutamicum에서 promoter-probe vector인 pSK1Cat을 이용해 분리된 프로모터를 함유하는 단편들 중 가장 높은 활성을 나타낸 P19 단편에 대한 심도 있는 분석을 수행하였다. Subcloning을 실시하여 프로모터 활성을 지닌 DNA 영역을 180 bp로 압축할 수 있었고 (P180), 이를 C. glutamicum의 균주개량 측면에서 그 활용성을 분석하였다. C. glutamicum에서 메치오닌 생합성에 관여하는 metX 유전자의 메치오닌에 의한 repression을 해제시키기 위하여 metX 유전자의 promoter를 P180 promoter로 교체하였고(P180-metX), P180-metX를 C. glutamicum에 도입하여 발현되는 homoserine acetyltransferase 활성을 다양한 성장 조건에서 측정하였다. MB 영양배지에서 배양하는 경우 P180-metX를 함유는 균주는 wild type보다 약 24배 높은 homoserine acetyltransferase 활성을 나타내었다. Tac 프로모터에 연계하는 경우 (Ptac-metX), 약 13배의 활성 증가만이 관찰되었다. 최소배지에서 배양한 후 분석한 결과, P180-metX에서의 발현양상은 배지에 첨가된 methionine에 의해 영향받지 않음을 확인하였는데, 이는 P180 단편이 생합성 유전자의 derepression에 의한 아미노산 생산균의 개량에 효율적으로 이용될 수 있음을 의미한다. P180-metA를 라이신 생산균에 도입하는 경우 최대 약 0.8 g/l의 메치오닌이 생산됨을 확인하였다. | ||
| Download PDF | 41(4)-10(p.300-305).pdf | ||