| Title | Nested PCR를 이용한 Streptococcus mutans의 검출 | ||
| Author | 최민호1, 유소영2, 임채광3, 강동완1, and 국중기2* | ||
| Address | 1조선대학교 치과대학 보철학교실, 2구강생화학교실, 3법의치학연구소 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 42(1),19-25, 2006 | ||
| DOI | |||
| Key Words | 16S rDNA, PCR primer, Streptococcus mutans | ||
| Abstract | 치아우식증의 원인균 중 하나인 Streptococcus mutans를 종 수준에서 동정할 수 있는 중합효소연쇄반응 프라이머를 개발하기 위하여 본 연구를 시행하였다. 표준균주인 S. mutans ATCC 25175T 및 본 연구에서 이용된 S. mutans 균주들의 16S rRNA 유전자 핵산염기서열을 바탕으로 S. mutans 종-특이 중합효소연쇄반응 프라이머(ChDCSmF2와 ChDC-SmR2)를 설계 및 제작하였다. 프라이머의 특이도는 S. mutans 11 균주와 구강 내 존재하는 12 세균 종(22 균주)을 대상으로 실시하였다. 프라이머의 민감도는 표준균주인 S. mutans ATCC 25175T의 유전체 DNA를 추출하여 실시하였다. 프라이머의 특이도 실험결과 10균주의 S. mutans 유전체 DNA에서만 종-특이 중합효소 연쇄반응 산물이 증폭되었고, 다른 세균종의 유전체 DNA에서는 증폭되지 않았다. 또한 감수성 실험 결과 본 연 구에서 사용된 프라이머는 direct PCR에 의해 S. mutans ATCC 25175T유전체 DNA 100 pg까지 검출 할 수 있었다. 또한 27F와 1492R 프라이머로 16S rDNA를 먼저 증폭한 다음, 이 증폭물 10배 희석한 것을 표적으로 해서 nested PCR을 시행한 결과 S. mutans ATCC 25175T 유전체 DNA를 2 fg까지 검출할 수 있었다. 이상의 결과를 종합할 때, ChDC-SmF2와 ChDC-SmR2 프라이머들은 S. mutans 균주 유전체 DNA에 대한 높은 민감도를 가지고 있으며, 종-특이적으로 동정 및 검출하는 데 이용될 수 있을 것으로 생각된다. | ||
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