Title Ultra Rapid Real-Time PCR에 의한 Human Immunodeficiency Virus (HIV)의 신속진단법
Author 이동우, 김을환, 유미선, 한상훈, and 윤병수*
Address 경기대학교 자연과학대학 생명과학과
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 43(2),91-99, 2007
DOI
Key Words HIV, human immunodeficiency virus, rapid diagnosis, ultra-rapid real-time PCR
Abstract 인간면역결핍바이러스(Human immunodeficiency virus; HIV) 진단을 위한 다중, 초고속 실시간 PCR법을 개발하였다. 검출 대상의 DNA 염기서열은 env 유전자를 기반으로 설계되었으며, 각기 HIV-1 특이 495염기(gi_1184090) 및 HIV-2 특이 294염기(gi_1332355)의 DNA를 안정상의 이유로 PCR을 이용한 유전자합성법으로 제작하여 사용하였다. 초고속 실시간 PCR은, PCR의 회전 중 각 단계별 설정시간을 극단적으로 축소하여, 1 μl의 PCR 용액용 microchip을 탑재할 수 있는 GenspectorTM을 사용하여 수행하였다. DNA증폭과 융점분석을 포함한 총 PCR 검색 시간은 HIV-1 및 HIV-2 모두에서 15분 이내로 완료되었으며, 각기 최소 2.3개의 합성 env 유전자로부터도 HIV-1 특이 117염기와 HIV-2 특이 119염기의 PCR산물을 성공적으로 증폭시킬 수 있는 민감성을 보여주었다. 이런 형식의 실시간 PCR법을 본 연구에서 초고속 실시간 PCR (Ultra-rapid real-time PCR)이라 명명하였다. 이는 본 연구의 대상인 HIV에 대한 보조적 진단방법일 뿐 아니라 PCR 검색법이 사용되고 있는 다른 병원체에 대하여도 적용될 수 있을 것이나, 우선 HIV 임상시료에 대한 본 검색법의 효용성 실험 등 추가 연구가 필요할 것으로 사료된다.
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