Title Sphingomonas sp. KS 301의 Superoxide Dismutase 정제 및 특성
Author 강희정1, 정재훈1, 최지혜1, and 손승렬2*
Address 1단국대학교 첨단과학부 미생물학전공, 2단국대학교 기초과학연구소
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 43(2),83-90, 2007
DOI
Key Words PAH, SOD, Sphingomonas
Abstract 유류오염 토양에서 난분해성 물질인 PAH (polycyclic aromatic hydrocarbon)들을 잘 분해하는 균주 중 SOD(superoxide dismutase) 활성이 높은 균주인 Sphingomonas sp. KS 301의 SOD특성을 알아보기 위하여 Ammonium sulfate 침전, DEAE-Sepharose 크로마토그래피, Superose-12 겔 여과 크로마토그래피, Uno-Q1 이온교환 크로마토그래피를 이용하여 SOD 단백질을 정제하였다. Sphingomonas sp. KS 301은 DEAE-Sepharose 크로마토그래피로 분석한 결과, 기존의 알려진 세균들과는 달리 서로 다른 5가지의 SOD 활성을 가지고 있는 것으로 나타났으며 본 연구에서는 그 중 SOD III를 부분 정제하였다. 정제한 SOD III는 Mn type 및 Fe type Escherichia coli SOD와 비교했을 때 비활성도(specific activity)가 5배로 높게 나타났다. SOD III의 분자량은 SDS-PAGE에서는 23 kDa 으로 측정되었으며 Superose-12겔 여과 크로마토그래피 후 native 상태의 분자량은 71 kDa으로 정제한 SOD는 3개의 소단위체로 구성되어 있는 것으로 보여진다. 정제한 SOD III의 최적 pH는 7.0 이었고 20oC에서 최적의 활성을 보였다. 또한 SOD의 종류를 알 수 있는 억제물질 NaN3, H2O2, KCN를 이용한 억제효과를 살펴보았더니 NaN3에만 억제되어 Mn type의 SOD임을 알 수 있었다. 또한 이 효소의 아미노 말단의 아미노산 서열은 Psudomonase ovalis 및 Vibrio cholerae의 SOD와 가장 유사하였다.
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