| Title | Paenibacillus sp. JB-13 Cyclodextrin Glucanotransferase 유전자의 E. coli에서의 발현 및 최적 생산 | ||
| Author | 김해윤1, 이상현2, 김해남3, 민복기4, 백형석1*, and 전홍기1 | ||
| Address | 1부산대학교 생명과학부, 2신라대학교 생명공학과, 3마산대학 뷰티케어과, 4을지의과대학교 임상병리학과 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 44(1),74-79, 2008 | ||
| DOI | |||
| Key Words | AA-2G, CGTase, cyclodextrin glucanotransferase, Paenibacillus sp. JB-13, transglucosylation | ||
| Abstract | L-ascorbic acid (AA)의 2번 위치의 수산기에 부위 특이적 활성을 갖는 Paenibacillus sp. JB-13 유래의 cyclodextrin glucanotransferase (CGTase, EC 2.4.1.19) 유전자(cgt gene)를 pEXP7 발현 vector에 클로닝하여 재조합 균주를 구축하였다. 재조합 균주의 CGTase 생산 최적 조건을 검토하여 본 결과 LB 배지에 0.5% glucose, 3.0% polypeptone, 0.3% K2HPO4, 0.5% NaCl이 되도록 추가하고, 초기 pH 7.0, 접종량 2%, 통기량 0.1 vvm, 배양 온도 37oC, 배양 시간 14시간의 조건에서 최대 활성을 나타내었다. 재조합 균주와 기존 균주의 CGTase 활성을 비교한 결과 재조합 균주는 배양 14시간째 640 units/ml의 활성을 가져 기존 균주에 비해 70%의 활성을 나타내지만 배양 시간을 1/4 로 단축시킬 수 있다는 이점이 있음을 확인하였다. 재조합 균주가 생산한 CGTase를 AA-2G 합성에 적용하여 AA-2G를 합성하고 HPLC로 분석한 결과 단일 peak를 확인할 수 있었고 α-glucosidase를 처리하여 확인한 결과 AA와 glucose로 분리됨을 확인할 수 있었다. | ||
| Download PDF | 44(1)_12_p.74-79.pdf | ||