Title Ultra Real-Time PCR을 활용한 Avian Influenza Virus Subtype의 조기진단법
Author 김상태1*, 김영균2, and 김장수3
Address 1이화여자대학교 생명약학부, 2국민대학교 삼림대학 삼림생명공학과, 3고려대학교 구로병원 진단검사의학과
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 47(1),30-37, 2011
DOI
Key Words avian influenza virus, hemagglutinin, molecular beacon, ReadyCell
Abstract 조류 인플루엔자 바이러스(AIV) 아형을 ultra-time PCR법(UPCR)을 이용하여 초스피드로 진단할 수 있는 방법을 고안하였다. 표적 대상의 프라이머는 AIV H5N1 아형의 hemagglutinin (HA) 유전자 중 가장 상보성이 높은 133 bp의 부위를 선택하였고, 실험의 안전을 위하여 인공합성의 방법으로 제작하였다. 압타머와 결합한 molecular beacon 기반 Mini-Opticon Q-PCR 기기를 사용한 UPCR법으로, 총 UPCR 반응액의 양을 10 μl으로, UPCR과 용융온도 분석시간을 15분 이내로 매우 짧게 단축시켰다. 민감도 측정에서 최소의 주형인 5분자의 HA 유전자만으로 정확히 AIV의 특이적 133 bp를 합성하였다. UPCR로 디자인된 이 PCR은 AIV 아형의 진단에 적용될 수 있을 뿐 아니라, UPCR이 기반되는 진단을 이용하여 다른 병원체에도 널리 적용 될 수 있을 것으로 기대된다.
Download PDF 47(1)_05_p.30-37.pdf