Title DNA Shuffling을 이용한 Paenibacillus polymyxa GS01의 다기능 β-Glycosyl Hydrolase (Cel44C-Man26AP558) 효소 활성 증가
Author 강영민1, 강태호2, 윤한대2, and 조계만3*
Address 1한국한의학연구원 한약연구본부 한약기초연구그룹, 2경상대학교 응용생명과학부 및 농업과학연구원, 3경남과학기술대학교 식품과학부
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 48(2),73-78, 2012
DOI
Key Words Paenibacillus polymyxa GS01, Cel44C-Man26AP558, DNA shuffling, multifunctional β-glycosyl hydrolase
Abstract 본 연구자들은 이전에 cellulase, xyalnase 및 lichenase의 다기능 효소활성을 지니는 절단된 Cel44C-Man26AP558의 β-glycosyl hydrolase를 보고하였다. 본 연구에서는 절단된 Cel44CMan26AP558 효소의 다기능성 β-glycosyl hydrolase 활성을 증가시키기 위해 DNA shuffling을 시도하였다. DNA shuffling에 의해 단일변이(P438A)를 가진 M2Cel44C-Man26AP558와 이중변이(A273T 및 P438A)를 가진 M21Cel44C-Man26AP558를 얻었다. 이중변이를 가진 M21Cel44C-Man26AP558은 단일변이를 가진 M2Cel44C-Man26AP558 보다 효소활성이 낮게 나타났으나, M2Cel44C-Man26AP558와 M21Cel44C-Man26AP558은 대조구인 Cel44C-Man26AP558 보다 약 1.3에서 2.2배 정도 높은 효소활성을 나타내었다. 특히, 단일변이를 가진 M2Cel44C-Man26AP558는 대조구인 Cel44C-Man26AP558보다 cellulase, xylanase 및 lichenase 효소활성이 약 1.5에서 2.2배 정도 높게 나타났다. β-Glycosyl hydrolase의 cellulase, linchenase 및 xylanase 최적효소활성은 각각 pH 7.0, 7.0 및 6.0에서 이었다. 이러한 결과는, 아미노산 잔기인 Ala438이 다기능성 β-glycosyl hydrolase 활성을 증가시키는 중요한 역할을 한다고 추정할 수 있다.
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