| Title | 위치 지정 치환 변이를 이용한 ErmSF의 ‘타깃 Adenine Binding Loop'을 형성하는 부위에 존재하는 223/227 Arginine 잔기의 23S rRNA Methylation 활성에서의 역할 규명 | ||
| Author | 진형종 | ||
| Address | 수원대학교 자연과학대학 생명공학과 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 48(2),79-86, 2012 | ||
| DOI | |||
| Key Words | in vivo, in vitro activity test, MLSB (macrolide-lincosamide-streptogramin B) antibiotic resistance factor protein, overexpression, site-directed mutagenesis | ||
| Abstract | ErmSF는 23S rRNA의 A2058 (E. coli numbering)에 methylation을 유발하여 macrolide-lincosamide-streptograminB (MLSB)계 항생제의 부착을 저해함으로써 항생제 활성을 억제하는 내성인자 단백질인 Erm 단백질들 중의 하나이다. Erm단백질들 사이에서 공통적으로 나타나는 222FXPXPXVXS230 (ErmSF numbering) 서열은 Erm 단백질인 ErmC′와 DNA methyltransferase인 M. Taq I의 구조를 분석한 연구에서 타깃인 adenine과 직접적으로 상호작용하는 부위로 제안되거나 확인되었다. 따라서 이 부분 중 Erm 단백질 사이에서 잘 보존되어있지는 않지만 염기성인 잔기의 특성상 기질인 RNA와 상호작용이 예상되는 223, 227번 arginine을 alanine으로 위치 지정 치환한 변이 단백질을 이용하여 그 잔기의 효소 활성에서의 역할을 확인하였다. 두 변이 단백질은 생체 내에서 그 활성을 여전히 유지하고 있어서 항생제인 erythromycin에 대하여 내성을 나타내었으나 in vitro 상에서는 R223A 또는 R227A가 야생형 ErmSF에 비하여 약 50%, 88%의 활성을 각각 나타내어 효소 활성에서 각 잔기가 결정적이지는 않지만 중요한 역할을 수행하고 있음을 확인하였다. | ||
| Download PDF | 48(2)_04_p.79-860.pdf | ||