| Title | 겨울우산버섯의 원형질체 분리와 유전자 형질전환 | ||
| Author | 유선화* and 김명길 | ||
| Address | 국립산림과학원 임산공학부 화학미생물과 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 50(4),372-375, 2014 | ||
| DOI | http://dx.doi.org/10.7845/kjm.2014.4070 | ||
| Key Words | Polyporus brumalis, protoplast, pYHgpt, transformation, white rot fungi | ||
| Abstract | 본 연구에서는 백색부후균인 겨울우산버섯의 원형질체 분리 조건과 유전자 형질전환 방법을 확립하였다. 겨울우산버섯 균사에 세포벽 분해효소로 0.5% Usukizyme을 처리하여 ml당 1 × 107개의 원형질체를 확보할 수 있었다. 형질전환체의 선별을 위해 hygromycin에 대한 저항성을 갖는 유전자(hph)를 선택표지로 이용하여 형질전환용 벡터(pHYgpt)를 제작하였다. 40% polyethylene glycol 용액과 aurintricarboxylic acid와 heparin, supermidine을 첨가하여 형질전환을 수행 한 결과 벡터 1 μg 당 100–160개의 수율로 형질전환체를 얻었다. 도입된 벡터는 hph 유전자의 PCR 증폭을 통해 형질전환체의 염색체내에 삽입되었음을 확인하였다. 이러한 결과는 polyporus 속의 유전자를 활용한 새로운 균주 개발에 유용한 기술이 될 것이다. | ||
| Download PDF | 50(4)_16_p.372-375.pdf | ||