| Title | 인간의 급성 비임파성 백혈암세포(HL60)의 표면항원에 결합하는 재조합 single-chain Fv (ScFv)의 개발 | ||
| Author | 김철홍1, 한승희1, 김형민1, 한재용2, 임명운3, and 김진규1* | ||
| Address | 1창원대학교 자연과학대학 미생물학과, 2서울대학교 농업생명과학대학 농생명공학부, 3(주)중겸 생명공학연구소 | ||
| Bibliography | Korean Journal of Microbiology, 51(2),115-125, 2015 | ||
| DOI | http://dx.doi.org/10.7845/kjm.2015.5015 | ||
| Key Words | human acute nonlymphocytic leukemia, HL60, IgM, Ni+-NTA-agarose, single-chain Fv, westernblot | ||
| Abstract | 단일클론항체 AP64 IgM은 인간의 급성 비임파성 골수암 (ANLL) 세포주 HL60에 결합하며 쥐의 ANLL 세포에도 교차 결합(cross-react)한다. 또한 complement에 의해 매개되어지 면 골수암 억제효과를 나타낸다. 본 연구에서는 RT-PCR에 의 해 AP64 IgM을 분비하는 하이브리도마의 VH 및 VL cDNA로 부터 유래된 재조합 single-chain variable domain fragment (ScFv)를 제조하였다. VH 및 VL은 15개 아미노산으로 구성된 linker (G4S)3으로 연결되었다. 재조합 ScFv는 Escherichia coli BMH 71-18에서 single polypeptide chain으로 발현되었 다. Periplasmic extract를 Ni + -NTA-agarose affinity column에 가하여 발현된 재조합 ScFv를 정제하였으며 westernblot으로 정제된 단백질을 탐지하였다. 정제된 재조합 ScFv는 AP64 IgM 모항체가 탐지하는 항원과 같은 HL60 세포의 표면항원 (약 30 kDa)을 인지하였다. 그러나 HL60의 표면항원에 대한 ScFv의 결합력은 AP64 IgM 모항체보다 낮아서 추후 이에 대 한 개선이 필요하다. 종합하여 볼 때 HL60 세포주에 특이적인 재조합 ScFv는 진단 또는 치료목적으로 유용한 생물학적 제 재가 될 수 있을 것이다. | ||
| Download PDF | 51(2)_03_p.115-125.pdf | ||