| Abstract |
소의 혈액, 세포, 조직, 기관 등이 생물의약품, 조직공학제
제, 세포치료제, 의료기기의 원재료로 널리 사용되고 있다. 소
유래 성분 원재료에 다양한 바이러스가 오염된 사례가 있기
때문에 소유래 물질을 원재료로 사용한 제제의 바이러스 안전
성 검증이 필수적으로 요구된다. Bovine adenovirus type 1
(BAdV-1)은 소에게 가장 흔하게 감염되는 바이러스 중의 하
나이다. 소유래 물질을 원재료로 하는 생물의약품, 조직공학
제제, 세포치료제, 의료기기 등에서 BAdV-1 안전성을 확보하
기 위해, 세포주, 원재료, 제조공정, 완제품에서 BAdV-1을 정
량적으로 검출하고, 제조공정에서 BAdV-1 제거 검증을 위한
시험법으로 활용이 가능한 TaqMan probe real-time PCR 시험
법을 확립하였다. 세포배양법에 의한 감염역가와 비교한 결과,
real-time PCR 검출한계는 7.44 × 10
1
TCID50/ml이었다. 확립
된 시험법의 신뢰성(reliability)을 보증하기 위해 시험법 검증
을 실시한 결과, 특이성(specificity)과 재현성(reproducibility),
완건성(robustness)이 우수함을 확인하였다. 확립된 real-time
PCR을 생물의약품 제조공정 검증에 적용할 수 있는지 확인한
결과, 인위적으로 BAdV-1을 오염시킨 Chinese Hamster Ovary
(CHO) 세포주에서 BAdV-1를 정량적으로 검출할 수 있었다.
확립된 시험법을 항체의약품 생산용 CHO 마스터 세포주와
소유래 type 1 collagen에서 BAdV-1 검출 시험에 산업적으로
적용하였다. 위와 같은 결과에서 확립된 BAdV-1 real-time
PCR 시험법은 감염역가 시험법과 같은 생물학적 시험법을 대
신할 수 있는 신속하고, 특이성과 민감성이 우수한 시험법임
을 확인하였다. |
