Title 희소방선균 SeaR 유전자가 Streptomyces virginiae의 virginiamycins 생산에 미치는 영향
Author 류재기1, 김현경1, 김병원1, 김동찬1, and 이형선2*
Address 1김천대학교 임상병리학과, 2중원대학교 임상병리학과
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 51(3),256-262, 2015
DOI http://dx.doi.org/10.7845/kjm.2015.5030
Key Words Saccharopolyspora erythraea, SeaR gene, Streptomyces virginiae, transformant, virginiamycin
Abstract 본 연구는 희소방선균 Saccharopolyspora erythreae receptor gene (SeaR)의 기능을 연구하기 위해 다른 속의 균주인 Streptomyces virginiae에 SeaR 유전자를 도입하였다. S. virginiae의 형질전 환은 oriT, attP, ermEp * 과 SeaR 유전자 단편을 가지고 있는 Φ C31 유래의 integration vector인 pEV615 (6.6 kb)를 이용하여 Escherichia coli ET12567/pUZ8002를 DNA 공여체(donor) 로 이용한 접합전달법(conjugal transfer)을 사용하여 확립하 였다. SeaR 유전자의 삽입 유무는 PCR방법으로 확인하였고, SeaR 유전자의 전사 발현은 RT-PCR방법으로 확인하였다. S. virginiae의 경우, virginiamycins 생산은 wild type (S. virginiae) 와 transformants (C1, C3) 모두 최초생산시기가 14시간으로 같았다. VB-C6 첨가시기에 따른 항생물질 유도능 확인결과 본 배양 4시간에 VB-C6 첨가 시 wild type과 transformants (C1, C3) 모두 VB-C6에 의한 virginiamycins 생성이 유도되지 않았 다. 본배양 6시간, 8시간에 VB-C6 첨가하였을 시 VB-C6에 의 한 virginiamycins 생성이 유도되는 것을 확인하였다. 이 결과 는 VB-C6에 의한 유도의 경우 S. virginiae 내의 BarA에 의해 VMs 생산시기가 2-4시간 단축되었다고 사료되나, transformants C1, C3의 경우 VB-C6 첨가 시 virginiamycins 생산이 억제되 는 것은 SeaR이 virginiamycins 생합성 유전자에 결합하여 억 제자로 기능 한다고 추정 되었다. 이러한 결과로 인하여 외부 에서 도입된 SeaR gene이 virginiamycins 생산에 영향을 주는 것으로 확인되었다.
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