Title ARDRA와 DGGE를 이용한 Halichondria panicea 해면의 공생세균 다양성
Author 박진숙*
Address 한남대학교 생명시스템과학과
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 51(4),398-406, 2015
DOI http://dx.doi.org/10.7845/kjm.2015.5069
Key Words Halichondria panicea, 16S rRNA gene, ARDRA, bacterial diversity, DGGE, marine sponge
Abstract 제주도에서 채집한 해양 해면 Halichondria panicea의 공 생세균 군집구조를 배양에 의한 ARDRA와 비배양에 의한 DGGE 분석 방법에 의하여 조사하였다. 16S rRNA gene- ARDRA 분석을 위해 변형된 Zobell 배지와 Marine agar를 이 용하여 120균주를 선별하고 제한효소, HaeIII와 MspI을 사용 하여 ARDRA type을 구분하였다. ARDRA type으로부터 유 래한 16S rRNA gene 염기서열 분석 결과, 알려진 세균 종과 96% 이상의 유사도를 나타내었으며 Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Bacteroidetes, Firmicutes 등 3문 4강 이 관찰되었다. 그 중 Alphaproteobacteria가 우점하였다. 같 은 해면, H. panicea의 DGGE 분석을 위해 total genomic DNA 로부터 16S rRNA gene를 증폭하여 DGGE fingerprinting을 수행한 결과 14개의 밴드가 관찰되었다. 각 밴드의 16S rRNA gene 염기서열은 알려진 세균의 염기서열과 100%의 유사성 을 나타내었으며 대부분의 염기서열은 uncultured bacteria에 속하였다. DGGE 분석으로부터 미생물의 군집은 Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Acidobacteria, Actinobacteira, Bacteroidetes, Cyanobacteria, Chloroflexi 등 6문 7강으로 나 타났다. ARDRA와 DGGE 방법에 의해 Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Bacteroidetes가 공통적으로 발견되 었으나 전체적인 공생세균의 군집구조는 분석방법에 따라 차 이를 나타내었다. 배양에 의한 방법보다 비배양 방법에서 더 다양한 세균군집구조를 나타내었다.
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