Title Epigallocatechin Gallate (EGCG)에 노출된 용혈성 Bacillus cereus MH-2의 세포 반응 및 프로테옴 분석
Author 김동민, 박상국, and 오계헌*
Address 순천향대학교 자연과학대학 생명시스템학과
Bibliography Korean Journal of Microbiology, 52(3),260-268, 2016
DOI http://dx.doi.org/10.7845/kjm.2016.6044
Key Words Bacillus cereus MH-2, EGCG, epigallocatechin gallate, hemolysis
Abstract 본 연구의 목적은 시중에 판매되고 있는 쌈장에서 용혈성 을 가지는 Bacillus cereus MH-2를 분리하여, EGCG 노출에 따른 MH-2 균주의 세포 반응과 프로테옴 분석을 위해 수행되 었다. 다양한 농도의 EGCG에 노출된 MH-2 균주는 노출시간 이 증가함에 따라 생존률은 점차 감소함을 보였다. MH-2 균주 의 alginate 생성량은 EGCG의 농도가 증가함에 따라 감소하 였으며, 특정 EGCG 농도에서 노출시간이 진행됨에 따라 그 생 성량은 증가하는 것으로 나타났다. SDS-PAGE 및 anti-DnaK 와 anti-GroEL의 단일항체를 이용한 Western blot 통한 분석 으로, 두 가지 스트레스 충격단백질인 70 kDa의 DnaK와 60 kDa의 GroEL의 발현은 대수생장기의 배양에서 EGCG의 농도에 비례하여 감소하는 것을 확인하였다. EGCG에 노출된 세균의 세포 외부형태 변화를 주사전자현미경을 이용하여 관 찰한 결과, 세포 표면의 돌출부 생성과 함께 세포의 뭉그러짐 이 관찰되었다. EGCG에 노출된 Bacillus cereus MH-2 배양의 수용성 단백질 부분에 대한 2-DE에서 20개의 단백질 스팟이 EGCG 노출에 의해 크게 변화하는 것이 확인되었다. 장독소 (hemolysin BL lytic component L1, hemolysin BL-binding protein), chaperon (DnaK, GroEL), 세포방어요소(peptidase M4 family proteins), 에너지 및 물질대사 등에 수반되는 이들 단백질은 MALDI-TOF를 사용한 peptide mass fingerprinting 에 의해 동정되었다. 이들 결과는 B. cereus MH-2에 대한 EGCG-유도 스트레스와 세포독성의 기작을 이해하는데 중요 한 단서를 제공할 것이다.
Download PDF 52(3)_04_p.260-268.pdf