| Abstract |
두 종류의 mannanases를 생산하는 Cellulosimicrobium sp.
YB-43로부터 mannanase 유전자를 클로닝하고 그 염기서열을
결정하였다. Mannanase 유전자는 manB로 명명되었으며, 427
아미노 잔기로 구성된 단백질을 코드하는 1,284개 염기로 구성
되었다. ManB는 추론된 아미노산 배열에 근거해서 glycosyl
hydrolase family 5에 속하는 mannanase와 상동성이 높은 활
성영역과 함께 2개의 탄수화물 결합영역을 포함하고 있는 다
영역 효소로 확인되었다. Cellulosimicrobium sp. YB-43의
manB 유전자를 함유한 재조합 대장균의 균체 파쇄상등액으
로부터 정제된 ManB의 아미노 말단 배열이 QGASAASDG로 결정되었으며 이는 SignalP4.1 server로 그람 음성균을 기준으
로 예측된 signal peptide의 결과와 정확하기 일치하였다. 정제
된 ManB의 최적 반응조건은 55°C와 pH 6.5–7.0이며 locust
bean gum (LBG), konjac과 guar gum을 가수분해 하였으며, 셀
룰로스, 자일란, 전분과 para-nitrophenyl-β-mannopyranoside
에 대해서는 분해활성이 없었다. ManB의 활성은 Mg
2+
, K
+와
Na
+에 의해 약간 저해되었으며 Cu
2+
, Zn
2+
, Mn
2+과 SDS에 의
해서는 크게 저해되었다. 또한 이 효소는 mannobiose 보다 큰
중합도를 갖는 만노올리고당을 가수분해하였으며, LBG와 만
노올리고당을 가수분해하였을 때 mannobiose가 가장 많은 양
으로 생성되었다. |
